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Formation qualifiante : PCR quantitative en temps réel

Acquérir les bases théoriques et pratiques de la RT PCRq, choix des amorces, application transcriptomique : étude de l’expression des gènes, de la conception expérimentale à l’analyse critique des résultats.

PARIS

Contenu

PARTIE THÉORIQUE (10H)
► PCR en temps réel quantitative : principes et applications
► Exemples d’applications : quantification d’ARNm
► Normalisation du niveau des transcripts par un gène de référence : méthode mathématique pour choisir le « bon » gène de
référence, choix crucial pour les résultats
► Quantification relative et quantification absolue
► Choix et calcul des amorces oligonucléotidiques
► Les différents types de chimie : SYBR Green I, Taqman, FRET, 3’MGB, Scorpio, Beacon, UPL…
► Principes de l’extraction des ARN (principe de base de Chomczynski et Sacci et principe des colonnes), étude de l’intégrité,
qualité et quantité des ARN. Théorie de la transcription inverse
PARTIE PRATIQUE (18H)
► PCR en temps réel quantitative : quantification du niveau d’expression de gènes
► Choix et design des amorces oligonucléotidiques : manuellement, à l’aide d’un logiciel et in silico
► Recherche de séquences nucléotidiques in silico
► Extraction d’ARN par un kit. Quantification, vérification de la qualité et de l’intégrité des ARN

Objectifs

Connaissance des bases théoriques et pratiques de la RT PCRq, choix des
amorces, application transcriptomique : étude de l’expression des gènes,
de la conception expérimentale à l’analyse critique des résultats

Prérequis

N.C

Diplôme visé

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PARIS 1650 1 jour(s)
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